Expresión y co-localización de la proteína BRCA1 activada y γ-H2AX en cáncer de mama esporádico

El cáncer de mama es la neoplasia maligna más frecuente en las mujeres occidentales y ocupa el primer lugar en incidencia y muerte por cáncer en la mujer uruguaya. Existen varios factores involucrados en la carcinogénesis mamaria, entre ellos los estrógenos, los factores de crecimiento polipeptídicos y sus receptores de membrana, por ejemplo, EGFR (epidermal growth factor receptor) y HER-2 (human epidermal growth factor receptor 2), y varias proteínas intracelulares entre las cuales se encuentra BRCA1 (BReast CAncer susceptibility gen-1). La proteína BRCA1 es un supresor tumoral sometido a una lanzadera núcleo-citoplasma, que participa en la regulación de importantes funciones celulares tales como reparación del ADN por recombinación homóloga, activación transcripcional, apoptosis, control del ciclo celular y remodelación de la cromatina. En cuanto a la localización de la proteína, los resultados aportados por diferentes autores son heterogéneos, habiéndose identificado tanto por técnica de inmunohistoquímica como de inmunofluorescencia la presencia de BRCA1 en el núcleo, citoplasma, membrana celular, invaginaciones citoplasmáticas en el núcleo o en el citoplasma de células de tejido mamario normal y tumoral. Estudios en curso de nuestro grupo de investigación han comprobado la localización nuclear y citoplasmática de BRCA1 en secciones de tejido mamario normal y tumoral analizadas, encontrándose un porcentaje significativamente mayor de células con focos nucleares de BRCA1 en el tejido tumoral (53%) en comparación con su correspondiente tejido normal adyacente (33%, p=0,004; n=12). Asimismo, se obtuvo una correlación positiva entre el porcentaje de células con focos nucleares y el contenido (p=0,003) y estatus (p=0,002) del receptor de estrógeno. Múltiples son las proteínas que junto a BRCA1 se encuentran involucradas en la reparación del ADN, entre ellas se encuentra el biomarcador universal de daño al ADN, γ-H2AX, el cual forma complejos con BRCA1 que se visualizan como focos discretos nucleares. Debido a que el hallazgo de la proteína BRCA1 a nivel nuclear podría no implicar necesariamente que ésta sea funcional, es el objetivo del presente proyecto determinar si los focos nucleares de BRCA1 corresponden a la proteína activada (p-BRCA1), así como su co-localización con γ-H2AX. Asimismo se pretende determinar la utilidad clínica de estas moléculas como parámetros pronósticos en el cáncer de mama esporádico. Se incluirán 50 casos de cáncer mamario esporádico correspondientes a pacientes asistidas en el Servicio de Curieterapia del Complejo Hospitalario Pereira Rossell, previa firma del consentimiento informado. Se analizarán, mediante la técnica de inmunofluorescencia, secciones de tejido tumoral y normal adyacente fijado en formaldehído e incluido en parafina, proporcionados por el Servicio de Anatomía Patológica de dicha institución. El análisis se realizará mediante microscopía confocal y se valorará el porcentaje de células con focos nucleares de BRCA1, p-BRCA1 y γ-H2AX. Los datos obtenidos serán correlacionados con parámetros clínico-patológicos de la enfermedad.