Aportes al conocimiento de la regulación del tráfico intracelular de proteínas de membrana utilizando como modelo UreA, el transportador de urea de Aspergillus nidulans

Las proteínas de membrana son sintetizadas y translocadas cotraduccionalmente en la membrana de retículo endoplásmico (RE). El posterior tráfico vesicular hacia el Golgi y luego a la vía endosomal, la vacuola o la membrana plasmática, así como su internalización por endocitosis, son procesos dinámicamente regulados en respuesta a diferentes señales fisiológicas. En estos mecanismos de control participan elementos en cis en las proteínas y factores en trans que son coordinados para lograr un correcto tráfico vesicular. En este proyecto pretendemos aportar al conocimiento de estos mecanismos de regulación, utilizando como modelo UreA, el transportador de urea de Aspergillus nidulans. En respuesta al agregado de amonio, fuente preferencial de nitrógeno para este hongo, UreA es endocitado y degradado en la vacuola. En base a resultados previos obtenidos por el grupo de investigación, se ha producido una versión mutante de UreA que carece del dominio C-terminal y que es incapaz de alcanzar la membrana plasmática. La proteína permanece retenida en pequeñas vesículas de localización perinuclear, una disposición que se ha descrito como característica de proteínas residentes en el RE. En este dominio C-terminal se identifican posibles blancos de fosforilación y de ubiquitinación, por lo que proponemos llevar a cabo una disección de estas secuencias, mutándolas e investigando las consecuencias de estas mutaciones en el tráfico de UreA desde y hacia la membrana. Es importante destacar que los mecanismos que controlan el tráfico intracelular de transportadores parecen estar conservados desde los microorganismos eucariotas hasta los mamíferos. En humanos muchas enfermedades, así como el fracaso en el tratamiento con algunas drogas están vinculadas al malfuncionamiento de transportadores. En consecuencia, entender en detalle el funcionamiento de estas proteínas y cómo son reguladas a diferentes niveles es de interés, no solamente para el conocimiento del transporte como función celular, sino también desde un punto de vista médico y terapéutico. Se espera que los resultados de este proyecto contribuyan a este objetivo, permitiendo la identificación de factores en cis vinculados a la regulación del tráfico intracelular de proteínas de membrana y a la comprensión del rol jugado por los mismos en este proceso.