Efecto del envejecimiento del tejido prostático en el desarrollo del cáncer.

Nos proponemos estudiar el efecto del envejecimiento en el inicio del cáncer de próstata, en donde la edad del paciente es el factor de riesgo más importante para desarrollar esta patología. Durante el proceso de envejecimiento, la próstata sufre un progresivo endurecimiento que afecta sus propiedades visco-elásticas. Este es causado, entre otras cosas, por la acumulación en el tejido de productos finales de glicación avanzada (AGEs). Los AGEs se generan por la reacción de Maillard y median el entrecruzamiento entre las moléculas que participan en la reacción. Con el paso de los años la membrana basal (MB), que nutre y soporta a los acinos glandulares prostáticos, sufre acumulación de AGEs, resultando en el entrecruzamiento de las moléculas que la conforman. Esto lleva a la rigidez de la MB y al aumento de las fuerzas tensionales sobre la célula epitelial. Estas fuerzas son detectadas por mecano-receptores que activan cascadas que regulan la adhesión, la transición de un fenotipo epitelial a uno mesenquimal, el aparato contráctil celular y la remodelación de la matriz, contribuyendo a la adquisición de un fenotipo invasivo. Para estudiar cómo el ambiente tisular envejecido contribuye con el inicio del cáncer de próstata, hemos desarrollado un modelo de cultivo de acinos prostáticos sobre una MB rigidizada por la acumulación de AGEs. Cabe destacar que el grado de rigidez de la MB obtenido por esta técnica refleja fielmente el descripto en el estroma de un tumor maligno de próstata. Esta MB rígida induce un cambio en la arquitectura acinar con características propias de una lesión prostática intraepitelial premaligna. Este cambio fenotípico es mediado por el mecano-receptor Endo180 que reconoce el colágeno tipo IV glicado presente en la MB rica en AGEs; la inhibición de la función mecano-receptora de Endo180, mediante anticuerpos monoclonales, revierte el fenotipo inducido por la MB rígida. Con esta propuesta identificaremos las cascadas moleculares que son moduladas por el receptor Endo180 en cultivos 3D sobre MB rígida. Para ellos seguiremos la siguiente cadena de experimentos: 1) realizar una línea celular estable Endo180 negativa y su contraparte control; 2) cultivar en 3D con MB nativa o rica en AGEs las líneas celulares generadas; 3) extraer los ARN mensajeros de los cultivos en 3D para analizar sus transcriptomas; 4) identificar los genes expresados diferencialmente en las cuatro condiciones de cultivo (presencia o ausencia de Endo180 y MB nativa o rica en AGEs); 5) seleccionar los genes candidatos a participar de la mecano-señal recibida por Endo180 y validar los resultados mediante RT-qPCR, inmunofluorescencia y/o western blot. Este flujo de experimentos nos permitirá identificar las vías moleculares activadas por Endo180 que modulan la adhesión celular, la transición epitelio-mesenquimal, el aparato contráctil y la remodelación de la matriz en un ambiente rico en AGEs. Conocer estas vías es esencial para entender como la célula epitelial adquiere un fenotipo tumoral invasivo y resulta importante, tanto para la búsqueda de bio-marcadores, como para el desarrollo de terapias alternativas para el cáncer de próstata.