Relevamiento de Hepatozoon (Apicomplexa: Hepatozoidae) en ofidios del norte de Uruguay

La Hepatozoonosis es una parasitosis causada por protozoarios apicomplexos de la familia Hepatozoidae pertenecientes al género Hepatozoon. Se conocen más de 300 especies de Hepatozoon de las que unas 50 especies son reportadas en mamíferos domésticos y salvajes y 120 han sido determinadas en ofidios. En mamíferos, varias especies de Hepatozoon han sido reportadas parasitando cánidos domésticos y silvestres. En el caso del perro doméstico, es infectado por dos especies, Hepatozoon canis y Hepatozoon americanum, las cuales pueden ocasionar cuadros clínicos que pueden ser desde asintomáticos hasta provocar la muerte. En el caso de los ofidios las especies de Hepatozoon se encuentran aparentemente adaptadas a sus hospedadores naturales de forma que causan poca o ninguna patología sobre los mismos. En cambio, si la infección se produce en un hospedador no natural o en animales de cautiverio, esta puede causar inflamaciones graves como hepatitis necrótica, pancreatitis y esplenitis. El diagnóstico de Hepatozoon se realiza mediante frotis de sangre periférica con tinción de Leishman o Giemsa y actualmente también se incluye el diagnóstico mediante PCR a partir de sangre. En Uruguay la fauna de ofidios que incluye culebras y víboras consta de aproximadamente unas 35 especies, hasta el momento no se ha notificado la presencia de Hepatozoon en estas especies en el país. El principal objetivo de este estudio es detectar la presencia de Hepatozoon spp. en ofidios a partir de ejemplares hallados muertos en rutas del norte del Uruguay mediante la utilización de técnicas parasitológicas y de biología molecular. Las muestras se procesarán en el Laboratorio de Vectores y enfermedades trasmitidas del CENUR Litoral Norte - Salto. Con la sangre se confeccionarán frotis sanguíneos que se teñirán con solución de Giemsa (10%) en busca de eritrocitos parasitados con gamontes de Hepatozoon spp. Para biología molecular se extraerá ADN a partir de la sangre y se realizarán PCR utilizando primers que amplifican una región del gen 18S rARN de Hepatozoon spp. Los productos resultantes de la PCR se verificarán mediante electroforesis en gel de agarosa al 1.5% y los amplicones del tamaño esperado serán purificados mediante kit comercial y enviados a secuenciar. Las secuencias obtenidas se compararán con otras disponibles en el GenBank mediante la herramienta BLASTn (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST).