MODULACIÓN POR NITROALQUENOS DEL DESARROLLO DE ATEROSCLEROSIS

Los nitroalquenos (NO2-FA), derivados nitrados de ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga, son una familia de moléculas con propiedades biológicas interesantes; actúan como ligandos de los receptores nucleares PPAR, involucrados en la regulación del metabolismo lipídico, y como inhibidores de vías de señalización inflamatorias. En particular, son capaces de modular la activación de los monocitos/macrófagos, inhibiendo la producción de mediadores inflamatorios. La aterosclerosis es una enfermedad crónica donde hay una desregulación general del metabolismo lipídico asociada al encendido de vías inflamatorias. Los monocitos/macrófagos constituyen un componente clave del desarrollo de esta enfermedad, porque ingieren y acumulan lípidos transformándose en células espumosas que promueven la inflamación. Debido a las características intrínsecas de esta enfermedad, resulta interesante estudiar el potencial anti-aterogénico de los NO2-FA. Para ello proponemos estudios en un modelo in vivo, basado en el empleo de ratones deficientes en el receptor de la LDL, que reproduce los eventos característicos de la aterosclerosis. Estudiaremos si los ácidos nitroaraquidónico (AANO2) y nitrolinoleico conjugado (CLANO2) modulan el desarrollo de la aterosclerosis y compararemos sus efectos con el mediado por estatinas, drogas ampliamente utilizadas para controlar esta patología. Se evaluará el potencial anti-aterogénico de estos compuestos mediante: 1-cuantificación del área de placa de ateroma desarrollada a nivel de la válvula aórtica, 2-identificación de eventuales alteraciones histológicas en el hígado, 3-medición de los niveles de lípidos en sangre, 4-detección de la expresión de marcadores inflamatorios en bazo y aorta, y 5-detección de marcadores del metabolismo lipídico en hígado y bazo. Por otro lado, como los macrófagos son un componente clave del desarrollo de la enfermedad planteamos realizar estudios in vitro que nos permitan valorar si los NO2-FA pueden regular la acumulación de lípidos por los macrófagos, evitando su diferenciación en célula espumosa. Existen antecedentes que sugieren que los NO2-FA inhibirían esta diferenciación. El proyecto propone examinar más profundamente qué cambios moleculares estarían asociados, incluyendo posibles alteraciones en la expresión de receptores involucrados en la internalización de lípidos, y/o en moléculas que los transportan o están vinculadas a su metabolización. Finalmente, un punto crítico para la actividad de los NO2-FA es su propio transporte intracelular; por ser moléculas muy hidrofóbicas requieren la asistencia de proteínas de unión a lípidos. Los candidatos naturales para esta función son las proteínas de unión a ácidos grasos conocidas como FABP, pero no puede asegurarse que unan los NO2-FA ya que la nitración podría modificar las interacciones con el ácido graso. La propuesta incluye el análisis de la afinidad de unión por NO2-FA de las FABPs de expresión en hígado y macrófagos. Esta información aportará a la comprensión de los mecanismos moleculares que podrían participar en el transporte intracelular de los NO2-FA necesario para su interacción con proteínas blanco. En conjunto el proyecto permitirá profundizar en los efectos biológicos de los NO2-FA ahondando en la evaluación in vivo de su potencial anti-inflamatorio así como también en su capacidad para regular la adquisición y metabolismo de lípidos por los macrófagos, evento clave asociado al inicio y progreso de la aterosclerosis.