Estudio de variantes genéticas del Virus de la Hepatitis C asociadas a la resistencia a antivirales directos: su importancia en el uso de inhibidores de la polimerasa y la fosfoproteína viral.

El virus de la Hepatitis C (VHC) es la principal causa de hepatitis post transfusional a nivel mundial. Cerca de 71 millones de personas se encuentran infectadas crónicamente por VHC y se estima que aproximadamente unas 399.000 personas mueren anualmente por enfermedades hepáticas relacionadas con la hepatitis C. El VHC es un virus envuelto de ARN de simple cadena de sentido positivo, miembro del género Hepacivirus, perteneciente a la familia Flaviviridae. El genoma viral, de unos 9.6 Kb, posee un único marco abierto de lectura que codifica para una poliproteína de 3000 aminoácidos aproximadamente. Esta poliproteína es procesada, para dar lugar a 3 proteínas estructurales y 7 no estructurales. La alta tasa de error de la ARN polimerasa ARN dependiente, la elevada producción de la progenie viral y la presión del sistema inmune del hospedero le permite a la población viral emerger y adaptarse rápidamente al sistema inmune de los hospederos y los tratamientos farmacológicos antivirales. Además, la rápida evolución de este virus representa una enorme dificultad para el desarrollo de tratamientos profilácticos, como son las vacunas. Recientemente el desarrollo de nuevos fármacos antivirales de acción directa (DAA) contra proteínas virales ha revolucionado el tratamiento de la infección por este virus. La implementación de las DAAs ha permitido regímenes terapéuticos más cortos y sencillos. Sin embargo, la emergencia de variantes resistentes (RAVs) incluso en pacientes que aún no han sido tratados con este tipo de drogas, es preocupante. En este proyecto se plantea caracterizar variantes de las regiones genómicas que codifican para dos proteínas blanco de diferentes DAAs, NS5A y NS5B (fosfoproteína y polimerasa viral, respectivamente), que sean capaces de generar resistencia a los nuevos tratamientos antivirales. Esta caracterización se llevará a cabo empleando abordajes bioinformáticos (mapeo y modelado estructural) y abordajes moleculares y celulares (mutagénesis, clonado, transfecciones y cultivo viral). Los resultados que se obtengan podrían influir en la elección de un tratamiento con DAAs efectivo y redundaría en un beneficio para el paciente, quien no se sometería a una terapia ineficiente. Asimismo, estos tipos de análisis en un futuro podrían llegar a redundar también en un beneficio para el Estado, dado que algunas de las nuevas terapéuticas ya se encuentran cubiertas por el Fondo Nacional de Recursos. Cabe destacar que este proyecto realizará un gran aporte en lo referente al estudio de VHC en el Uruguay ya que permitirá implementar por primera vez estudios de VHC ex vivo, lo que nos abrirá un abanico de posibilidades en lo que refiere a la investigación sobre este virus en nuestro país. De igual modo, será innovador en lo que respecta a los ensayos de caracterización de potenciales sustituciones de resistencia no reportadas previamente, lo cual contribuirá a la farmacovigilancia en nuestro país, no solamente desde el punto de vista descriptivo, sino también funcional.