Enfoque proteómico y trancriptómico del estudio de la infección del Virus de la Hepatitis E in vitro .

El Virus de la Hepatitis E (HEV) pertenece a la Familia Hepeviridae, género Hepevirus el cual en función de análisis filogenéticos, se clasifica en al menos 5 genotipos (G). Cuatro de ellos (G1-G4) infectan humanos. La hepatitis E es endémica en algunas regiones en desarrollo de Asia y Africa y en México. Sin embargo, en la última década los casos de HEV autóctonos reportados en regiones no endémicas han aumentado dramáticamente, con lo cual actualmente a esta infección se la considera emergente. La presentación clínica de la enfermedad es amplia, desde subclínica a una hepatitis fulminante y en las zonas de moderada y alta endemicidad la infección por HEV es la causa más común de hepatitis viral aguda, dónde la mayoría de los casos tienen un curso clínico silencioso. HEV se trasmite principalmente por vía fecal-oral y zoonótica, siendo los cerdos el principal reservorio. Otras vías de trasmisión, incluyendo vertical y transplantaria, también han sido muy bien documentadas. La infección por HEV presenta una tasa de mortalidad menor al 4% en la población general en países tanto endémicos como no endémicos, siendo potencialmente grave en mujeres embarazadas infectadas con cepas de G1, ascendiendo el valor de esta tasa a un 20%. Esta complicación bien documentada deriva en gran parte de los casos en una falla hepática fulminante. Por su parte el G3, ampliamente distribuido a nivel mundial, puede desarrollar infecciones crónicas de importancia clínica en pacientes inmunosuprimidos. En un contexto nacional, nuestro laboratorio ha reportado recientemente los primeros casos de infección autóctona por HEV en humanos, siendo asociados a cepas de G3, el cual se encuentra ampliamente distribuido en el mundo. Posteriormente, nuestro grupo reportó un caso autóctono de un paciente infectado con el G1. Ambos genotipos de HEV fueron también detectados en cerdos, y recientemente fue evidenciada la presencia de HEV G1 en una muestra de agua residual en Montevideo. Muy poco es lo que se conoce de la biología y la virología molecular del virus. Actualmente, no existe un sistema eficiente de aislamiento viral para HEV in vitro, lo cual ha limitado un mayor y mejor entendimiento del ciclo viral, incluyendo la interacción del virión con las células huésped. El presente Proyecto pretende desarrollar y establecer un nuevo sistema más adecuado de aislamiento para HEV en una línea contínua de células hepáticas HuH-7 y Hep-G2, y así llevar a cabo análisis transcriptómicos y proteómicos aportando información novedosa que contribuya a un mayor entendimiento de los cambios celulares producidos por HEV durante la patogénesis. La inclusión de cepas de G1, de enorme impacto en población vulnerable, y G3, asociado a casos de cronicidad, refuerzan el impacto final del proyecto. La comparación con células no hepáticas y con no infectadas permitirá elucidar mecanismos moleculares asociados con la alteración de la función celular. Asimismo, se evaluará el rol de la proteína codificada por el ORF3 en los mecanismos apoptóticos de la células transfectadas con una forma recombinante del gen.